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使用PCR定量法测量线粒体DNA(mtDNA)的损坏程度与拷贝数变动

最编程 2024-02-18 20:19:31
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线粒体是真核细胞的重要细胞器,是细胞的“动力工厂”和细胞凋亡调控的关键元件。哺乳动物线粒体 DNA (Mitochondrial DNA,mtDNA)是一全长为 16.5kb左右的双链闭环分子。与核不同的是,线粒体基因组为多拷贝基因组。mtDNA 功能的完成既依赖于每一个mtDNA分子结构的完整性,也同时依赖于细胞中 mtDNA 的拷贝数。许多研究表明,癌症、神经退行性疾病、心血管疾病、糖尿病等疾病的发生发展与mtDNA大片段、全基因组的缺失及拷贝数变化密切相关。为更准确定量检测mtDNA损伤和拷贝数的改变,Detroit R&D公司新推出了两款通过PCR定量分析检测mtDNA损伤和拷贝数的试剂盒。

mtDNA损伤分析试剂盒

该试剂盒可用于人、大鼠或小鼠的血液、细胞或组织。适用于由于DNA缺失和DNA链断裂导致的DNA损伤。Detroit R&D的mtDNA损伤分析试剂盒只需要少量的检测样本,即可快速、简单的进行高通量分析。

试剂盒主要成分:

● 2×浓缩QPCR缓冲液

● QPCR 引物(正向和反向引物)

● QPCR test DNA

● 5×增强子

● RT-PCR标准品

● RT-PCR引物(正向和反向引物)


左:RT-PCR标准品扩增曲线图;   右:8.8kb mtDNA 的RT-PCR标准曲线图

产品信息 

名称货号规格

Human Mitochondrial DNA Damage AssayDD2H40 reactions

Rat Mitochondrial DNA Damage Assay   DD2R40 reactions

Mouse Mitochondrial DNA Damage AssayDD2M40 reactions

mtDNA拷贝数定量检测试剂盒 

该DNA分析试剂盒是利用RT-PCR方法,以核DNA (nDNA) 为基准对线粒体DNA (mtDNA) 拷贝数进行相对定量检测。可用于检测人、大鼠或小鼠样本。

试剂盒主要成分:

● 96孔PCR板

● RT-PCR反应混合物 

● 线粒体DNA(mtDNA)引物

● 核DNA(nDNA)引物

● 阳性对照


正常人与糖尿病患者视网膜mtDNA拷贝数的比较

Santos et.al. Free Radical Biology & Medicine 51: 1849-1860, 2011.

左:大鼠阳性对照RT-PCR扩增曲线             右:mtDNA的RT-PCR分析

产品信息

名称货号规格

Human Mitochondrial Copy Number Assay   MCN144 reactions

Rat Mitochondrial Copy Number Assay    MCN244 reactions

Mouse Mitochondrial Copy Number AssayMCN344 reactions


近期参考文献

1.Singh, K. et al. (2020) Developmental regression and mitochondrial function in children with autism. Annals of Clinical and Translational Neurology 7: 683-694. 

Mishra, J.S. et al. (2020) Testosterone decreases placental mitochondrial content and cellular bioenergetics. Biology 8L176;

Guo, X. et al. (2020) STAMP: a multiplex method for simultaneous evaluation of mitochondrial DNA heteroplasmies and content.


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